Ferrando und Guglielmo nehmen ihre Verlobten gegen Don Alfonso in Schutz, der behauptet, kein Mädchen sei ewig treu. Schließlich wetten sie, dass Dorabella und Fiordiligi sie niemals verraten würden. Alfonso verlangt, die Mädchen einen Tag lang auf die Probe stellen zu dürfen. Er benachrichtigt Fiordiligi und Dorabella, dass ihre Verlobten sofort ins Feld einrücken müssen. Beide Männer nehmen scheinbar verzweifelt Abschied von ihren Verlobten. Fiordiligi und Dorabella geben sich dem Trennungsschmerz hin, den Despina mit leichtfertigen Redensarten zu mildern sucht. Alfonso besticht Despina, seine beiden als Albaner verkleideten Freunde den Schwestern vorzustellen. Ferrando und Guglielmo machen den Mädchen vorerst erfolglos den Hof. Schon wollen die beiden Offiziere die Treue ihrer Mädchen preisen, als ein Selbstmordversuch, den Alfonso vortäuscht, Dorabellas und Fiordiligis Widerstand weichen lässt. Beide kümmern sich um die "Schwerkranken", die letztlich Despina, als Arzt verkleidet, wiederbelebt.

Während Despina die Mädchen unterrichtet, wie man einen Mann an sich fesseln kann, bringen die beiden "Albaner" ihren Angebeteten ein Ständchen. Alfonso und Despina führen die neuen Paare zusammen. Dorabella erliegt Guglielmos stürmischen Werben. Als Ferrando dies erfährt, glaubt er, verzweifeln zu müssen. Guglielmo versucht, ihn zu trösten. Endlich gibt auch Fiordiligi Ferrandos Ansturm nach, der gedroht hatte, sich vor ihren Augen zu erdolchen, wenn er nicht erhört werde. Dieses Mal ärgert sich Guglielmo über seine Braut, doch Alfonso, der seine Wette gewonnen hat, meint: So machen’s alle. Schon sind die neuen Ehekontrakte zum Unterschreiben bereit, als Marschmusik die Rückkehr der richtigen Verlobten ankündigt. Wenig später erscheinen die "Albaner" in ihrer gewohnten Kleidung und entdecken den beschämten und um Verzeihung bittenden Mädchen die Komödie. Alfonso streicht die gewonnene Wette ein.